污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。
一開(kāi)始就要十分重視防止污染否則會(huì)前功盡棄不僅浪費(fèi)時(shí)間而且浪費(fèi)人力、物力甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的污染不僅僅指微生物而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)包括生物和化學(xué)物質(zhì)。
預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生污染的好辦法。只有預(yù)防工作做在前才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。
一般預(yù)防可從以下幾方面著手：
1、添加抗生素
2、從物品、用品消毒滅菌著手
細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)并在無(wú)菌試驗(yàn)陰性后才能使用。
操作室及剩余的無(wú)菌器材要定期清潔消毒滅菌。
3、從操作者做起
3.1進(jìn)無(wú)菌室前要用肥皂洗手按規(guī)定穿隔離衣。工作開(kāi)始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶和燒灼瓶口。
3.2操作者動(dòng)作要輕必須在火焰周?chē)鸁o(wú)菌區(qū)內(nèi)打開(kāi)瓶口并將瓶口轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼。操作時(shí)盡量不要談話(huà)若打噴嚏或咳嗽應(yīng)轉(zhuǎn)向背面。
3.3操作時(shí)要常更換吸管一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去。實(shí)驗(yàn)完畢用消毒水浸泡的紗布擦臺(tái)面。
4、防止細(xì)胞交叉污染
在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)所用器具要嚴(yán)格區(qū)分。
在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí)注射器和滴管不要觸及細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)液中污染其他細(xì)胞。
細(xì)胞一旦購(gòu)置或從別處引入均應(yīng)及早留種凍存一旦發(fā)生污染可重新復(fù)蘇培養(yǎng)。
5、細(xì)胞無(wú)菌室的徹底消毒
5.1高效消毒劑或殺孢子劑全面徹底擦洗無(wú)菌室
5.2過(guò)氧化氫氣體熏蒸法過(guò)氧化氫是一種廣譜滅菌劑，其水溶液和干霧氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用，安全、高效、環(huán)保，并且干霧氣體狀態(tài)比水溶液更具殺滅效果。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞室環(huán)境及人員操作污染風(fēng)險(xiǎn)大，過(guò)氧化氫干霧滅菌方法能把這種污染風(fēng)險(xiǎn)降至zui低，其靈活快速的消毒特點(diǎn)更能為細(xì)胞污染預(yù)防提供有力支撐，細(xì)胞房環(huán)境、培養(yǎng)箱等均可輕松進(jìn)行滅菌處理而無(wú)需再投入過(guò)多的人力和物力，以及整個(gè)細(xì)胞房全面徹底的消毒和應(yīng)急消毒優(yōu)勢(shì)無(wú)以倫比。
法國(guó)oxypharm過(guò)氧化氫干霧滅菌器源于歐盟GMP設(shè)計(jì)，自身符合潔凈區(qū)凈化要求，不帶入任何外源污染的同時(shí)高效根除潔凈室空間微生物（細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等），達(dá)到生物凈化無(wú)菌要求的目標(biāo)。其采用了全球先進(jìn)的干霧化技術(shù)，霧化顆粒小于3微米，增效了空間擴(kuò)散均勻性，迅速?gòu)浡錆M(mǎn)整個(gè)密閉空間不放過(guò)每一處縫隙和死角，滅菌效果堪稱(chēng)空前絕后，其均勻性、無(wú)殘留及對(duì)設(shè)備無(wú)傷害特征非常吻合細(xì)胞房環(huán)境消毒及培養(yǎng)箱里外消毒。
干霧過(guò)氧化氫滅菌器源于歐洲法國(guó)，專(zhuān)門(mén)針對(duì)潔凈無(wú)菌室細(xì)胞間設(shè)計(jì)，適應(yīng)大空間滅菌，小空間滅菌更靈活。采用了全球先進(jìn)霧化技術(shù)，霧化粒徑平均達(dá)到3—5微米，配合空間殺孢子劑使用，滅菌效果能對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢降低6個(gè)對(duì)數(shù)值，輕松殺滅細(xì)菌、真菌及病毒。
原理是：其采用獨(dú)到而特殊的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，使得在僅僅輸入電能的情況下，集壓縮、ventur噴射和霧滴內(nèi)外部濺射碎化功能于一體，使專(zhuān)用液態(tài)殺孢子劑變成氣霧狀態(tài)極微小顆粒噴出，高速極小微粒與空氣接觸后充分氣化，變成氣態(tài)過(guò)氧化氫即為“干霧”。干霧氣體在空氣里做布朗運(yùn)動(dòng)擴(kuò)散到每個(gè)角落及縫隙，均勻充滿(mǎn)整個(gè)無(wú)菌室，過(guò)氧化氫氣體依靠自身羥基的殺菌活性捕捉細(xì)菌及病毒分子，破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，滲入細(xì)胞內(nèi)部分解DNA核酸及功能蛋白，產(chǎn)生不可逆的殺滅作用。
oxypharm過(guò)氧化氫滅菌優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)：
1、殺菌效果好，對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢10分鐘有6個(gè)log的殺滅率；
2、廣譜的殺菌能力，能殺滅包括細(xì)菌、病原菌（支原體、衣原體、立克次氏體）、芽孢、真菌及病毒在內(nèi)的200多種微生物，滅菌原理特殊無(wú)耐受性產(chǎn)生；
3、平均5um干霧顆粒，擴(kuò)散性非常優(yōu)良，能擴(kuò)散到每一個(gè)衛(wèi)生死角落，在空氣中做不規(guī)則布朗運(yùn)動(dòng)；
4、干霧氣體性能穩(wěn)定，不受環(huán)境濕度、溫度、PH的影響，活性羥基穩(wěn)定攻擊微生物活體；
5、無(wú)色無(wú)毒，無(wú)殘留，安全可靠，完全分解為氧氣和水；
6、資質(zhì)齊全，通過(guò)國(guó)際ISO9001認(rèn)證、CE認(rèn)證，國(guó)家疾控中心檢測(cè)報(bào)告；
7、殺菌時(shí)間超短，2-3個(gè)小時(shí)可完成整個(gè)滅菌流程，高效節(jié)能；
8、設(shè)備體積小，操作方便，靈活移動(dòng)滿(mǎn)足不同空間需求，適應(yīng)大空間滅菌；
9、性?xún)r(jià)比高，節(jié)約消毒成本。
細(xì)胞室徹底消毒預(yù)防細(xì)胞污染，代替甲醛熏蒸的安全無(wú)害方法為過(guò)氧化氫干霧滅菌技術(shù)，作為新型的細(xì)胞房空間消毒方式和擁有更加高效靈活便捷的消毒優(yōu)勢(shì)將越來(lái)越受到歡迎。細(xì)胞培養(yǎng)重在預(yù)防，選擇合理好用的過(guò)氧化氫干霧消毒方法，做好前期防護(hù)工作，方可節(jié)約細(xì)胞培養(yǎng)運(yùn)作成本，提高效益。
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